1982年10月27日，冢本高史出生于东京都八王子市。父母是相恋后早早就结婚生子的年轻人，高史从小跟年轻的父亲一起游泳滑雪，像朋友一样融洽相处。冢本高史热爱音乐，挚爱的偶像是日本著名摇滚乐团「X-JAPAN」已故的吉他手hide，高史从小爱搜集hide的各种周边，并以他为榜样自己创作音乐，理想是当一名歌手。 1995年，母亲为他向SunMusic投去简历，高史随后被该事务所录取。 1997年，高史出演了浅野温子主演的连续剧「职员室」，开始了日剧方面的演出。2000年，高史出演了著名导演深作欣二的经典作品「大逃杀」，在片中饰演头脑一流的天才骇客三村信史。正是因为参与了这部电影的演出，让他体会到了拍摄时的乐趣，开始有了想要当一个好演员的想法。在电影的拍摄过程中，高史与影片中饰演杉村弘树的演员高冈苍甫成为好友。2002年的连续剧「木更津猫眼」让高史在日本人气急升，共演者佐藤隆太、冈田义德也成了他的大亲友。之后高史和佐藤隆太、冈田义德、小栗旬四人曾经组过乐队，可惜由于四人聚少离多，乐队还未正式成立就被迫解散了。 自从「木更津猫眼」的合作之后，高史成为鬼才编剧宫藤官九郎的御用，陆续在宫九创作的多部影视剧中担任角色。 高史喜欢看综艺节目，模仿能力很强。搞笑艺人组合robot中的秋山竜次是他喜欢的搞笑艺人。由于高史红润嘴唇的特点，在上节目「笑っていいとも！」时，经常被主持人以“嘴唇很漂亮呢！”、“是不是涂了口红？”等话语频繁打趣。2003年，高史推出了首支个人单曲「ヒトリゴト」，圆了他的歌手梦。2005年，高史参演了中日合拍电影「恋爱地图」，与李小璐合演上海篇，开始为中国影迷所认识。2007年时又出演了中日合拍电影「夜·上海」。2007年5月，高史与认识两年多的圈外女友A小姐入籍。入籍日期是女友的生日。出于保护家人考虑，妻子A小姐的样子从未在媒体面前曝光过，只知道A小姐年长高史7岁、是个类似土屋安娜的美女御姐。两人的婚礼也只请了少数家族内部人员出席。