2001年，高昌锡进入话剧团开始了他的表演生涯。 2004年，高昌锡出演其首部长篇电影作品《最后一只狼》走上大银幕。 2006年，高昌锡参演了由奉俊昊执导，宋康昊、裴斗娜等主演的科幻电影《汉江怪物》。 2008年9月11日，由苏志燮、姜至奂、洪秀贤主演的黑帮题材动作片《电影就是电影》上映，高昌锡因在片中饰演电影导演而获得第29届韩国青龙电影奖最佳男配角奖提名； 11月13日，参演的由闵奎东执导，朱智勋、金材昱、刘亚仁、崔智浩等主演的浪漫喜剧《西洋古董洋果子店》上映。 2009年4月30日，由朴熙坤执导，金来沅、严正花主演的犯罪电影《仁寺洞丑闻》上映，高昌锡饰演韩国最强的伪作工匠“浩真士”； 10月15日，搭档俞承豪、金英浩主演的剧情片《父山》上映，高昌锡饰演为了挽救养子的生命而孤军奋战的父亲。 2010年2月4日，参演的由张勋执导，姜栋元、宋康昊主演的动作片《义兄弟》上映，高昌锡由此获得第31届韩国青龙电影奖最佳男配角奖提名； 而在6月24日上映的励志影片《赤脚梦想》中，高昌锡因饰演大使馆员工“仁吉”而获得第18届春史电影节最佳男配角奖。 2011年2月24日，搭档朴熙顺、陈久主演的古装动作片《血斗》上映，高昌锡饰演因被抓去充军而当逃兵的平民“斗洙”，凭此角色获得第48届韩国电影大钟奖最佳男配角提名； 7月20日，由张勋执导，申河均，高洙等联袂主演的战争电影《高地战》上映，高昌锡由此获得第32届韩国青龙电影奖最佳男配角提名及第20届釜日电影赏最佳男配角奖。 2012年6月21日，高昌锡与高贤贞、刘海镇、成东日、李文植等主演的动作片《高小姐计划》上映，高昌锡饰演鬼马搞笑不靠谱的警察； 8月8日，由金柱浩执导，车太贤、吴智昊、闵孝琳等人主演的古装动作喜剧片《随风而逝》上映，高昌锡在片中饰演盗墓专家“洪硕昌”。 2013年6月5日，高昌锡参演的由张哲秀执导，金秀贤、朴基雄、李玹雨主演的动作喜剧片《伟大的隐藏者》上映，饰演北朝鲜间谍“徐尚久”； 2014年2月20日，与金康宇、郑在泳等主演了韩国首部以演艺界谣言为题材的影片《危险的传闻》，饰演窃听界神话“白文”； 8月4日，由李周焕执导，丁一宇，高胜熙，郑允浩、徐睿知主演的青春浪漫历史剧《巡夜人日志》首播，高昌锡饰演驱魔三人组之一的“正胜”； 12月24日，高昌锡与金宇彬、李玹雨主演的犯罪动作片《高手们》上映，其在片中饰演了人力调配专家“久仁”。 2015年1月7日，由池城和黄静茵主演的治愈系浪漫爱情喜剧《Kill Me Heal Me》首播，高昌锡在剧中饰演健康精神科博士“石浩必”。