2004年，参加SUBESUBE Queen（光滑皇后）选拔大赛并获冠军 。 2005年，担任TV show 节目 Mnet《Wide 演艺新闻》的主持。2007年，在MBC特别企划的职业爱情剧《H.I.T》中饰演医院里的护士，尹周熙也凭借该剧正式以演员身份出道 ，4月，客串SBS金土爱情剧《蓝鱼》，9月，出演SBS周末剧家庭剧《糟糠之妻俱乐部》在剧中饰演房室长，10月，与韩智慧，金基石合作出演了KBS家庭剧《爱也好恨也好》在其中尹周熙扮演一天要看几十次镜子的镜子公主徐珠京一角 。2008年9月，与梁静雅、尹素怡共同主演SBS家庭剧《玻璃之城》，5月出演惊悚电影《恶魔双胞胎》里的女鬼春三。2009年10月，出演KBS周末家庭剧《可疑的三兄弟》，在其中尹周熙扮演检察官李泰白一角，同月参演MBC爱情偶像剧《制造情缘》。2010年1月，特别出演KBS水木历史剧《推奴》；10月8日，与柳德焕共同主演OCN的医疗推理剧《神的测验（第一剖）》尹周熙在剧中饰演从纽约留学归来后担任法医事务所的专任刑警的姜京熙 ；9月，与金英浩、黄仁英参与拍摄爱情电影《第八段感情》。2011年8月，客串KBS周末家庭剧《鹊桥兄弟们》在剧中饰演泰植的相亲对象艺珍一角 ；12月，朴海美、李在勇、姜志燮合作主演MBN偶像剧《愈发霸气》尹周熙在其中饰演李恩星 。2012年5月，与宋承宪、朴敏英、金在中、李凡秀等人联袂主演MBC周末特别企划爱情连续剧《仁医》饰演染上梅毒的妓生桂香一角；10月，尹周熙在SBS水木古装历史剧《大风水》中饰演李成桂的夫人康氏夫人。2013年2月，尹周熙接演KBS水木谍战连续剧《IRIS 2》中局长秘书，是IRIS在NSS的间谍、NSS副局长秘书李秀珍一角；4月，出演SBS周末情感家庭剧《Wonderful Mama》在剧中扮演长浩的秘书金兰熙；12月，出演SBS月火爱情连续剧《温暖的一句话》中出演真哲的妻子尹善雅一角 。2014年2月，在SNS家庭爱情剧《Love in Memory2》扮演智恩 ；5月28日，主演OCN的医疗推理剧《神的测验4》尹周熙在剧中饰演精英刑警姜京熙一角 ；12月，尹周熙与李英雅、高周元、柳镇一同主演SBS家庭爱情剧《奔跑吧玫瑰》在其中尹周熙饰演民哲的妹妹Interior会社职员姜敏珠 。2015年9月，出演JTBC的金土爱情迷你连续剧《D-day》在剧中扮演首尔未来医院急诊室专科护士朴智娜一角 。